Jornal de Neurociências e Pesquisa Clínica

Anticorpo para MyoD diminui a expressão do gene da miogenina e o agrupamento do recetor de acetilcolina induzido por Agrin

Erica E Anderson, David H Campbell, Kelly Ezell, Paul R Standley e Wade A Grow

Objectivo: Uma família de factores reguladores miogénicos, incluindo o MyoD e a miogenina, orientam a miogénese e a formação de sinapses neuromusculares. A expressão do gene da miogenina é ativada pelo MyoD, e uma das funções da miogenina é ativar a expressão do gene do recetor da acetilcolina (AChR) na sinapse neuromuscular. Os neurónios motores libertam agrina à medida que se aproximam das fibras musculares esqueléticas em desenvolvimento, o que leva ao agrupamento dos AChR existentes no local de formação das sinapses neuromusculares. Demonstramos anteriormente que a exposição contínua ao anticorpo para MyoD ou miogenina diminui o agrupamento de AChR induzido por agrina na cultura de células musculares esqueléticas C2C12. O nosso objetivo foi estabelecer mais especificamente como o MyoD e a miogenina interagem no desenvolvimento. Métodos: Culturas de células C2C12 foram expostas a manipulações experimentais incluindo anticorpos para MyoD e miogenina e miogenina morfolino. O Endo-Porter foi utilizado para aumentar a absorção celular das manipulações experimentais. Foram realizados ensaios de agrupamento de AChR para avaliar o efeito do anticorpo ou morfolino no agrupamento de AChR induzido por agrina. Foram realizados Western blots para avaliar a expressão do gene da miogenina após exposição ao anticorpo ou morfolino. Resultados: Os resultados aqui reportados demonstram que a exposição de apenas oito horas ao anticorpo contra a miogenina pode diminuir o agrupamento de AChR induzido pela agrina nos miotubos. Demonstramos anteriormente que algumas manipulações experimentais reduzem a expressão do gene da miogenina concomitantemente com uma diminuição do agrupamento de AChR induzido pela agrina. Os resultados atuais estabelecem mais especificamente como o MyoD e a miogenina interagem na formação de sinapses neuromusculares, demonstrando que a exposição ao anticorpo para o MyoD reduz a expressão do gene da miogenina concomitante com uma diminuição do agrupamento de AChR induzido pela agrina. Conclusão: Estes resultados sugerem que MyoD é essencial para o agrupamento de AChR induzido por agrina através de um mecanismo que inclui a ativação da expressão do gene da miogenina, levando à ativação da expressão do gene AChR e, finalmente, à produção de um nível apropriado de AChR para o agrupamento de AChR induzido por agrina e formação de sinapses neuromusculares.