Jornal de Pesquisa Farmacêutica e Entrega de Medicamentos

Desenvolvimento e Validação de um Método Cromatográfico para a Quantificação de Isoniazida em Plasma Humano

Alshaikheid M, Fredj NB, Chaabane A, Chadli Z, Slama A, Boughattas N, Lassoued MA, Aouam K

Objectivo: A isoniazida (INH) é um importante tratamento antituberculoso, caracterizado por um índice terapêutico estreito e uma grande variabilidade dentro e entre doentes. Assim, a Monitorização Terapêutica do Medicamento (TDM) deste medicamento é obrigatória, de forma a otimizar a eficácia e minimizar a ocorrência de efeitos secundários tóxicos deste medicamento. O objetivo do presente estudo é desenvolver e validar um método cromatográfico simples para a determinação de INH em plasma humano.

Métodos: A cromatografia líquida de alta eficiência foi realizada utilizando um cromatógrafo Ultimate 3000®. A extração do INH do plasma foi realizada utilizando ácido tricloroacético (TCA). A nicotinamida foi utilizada como padrão interno (SI). A fase móvel foi constituída pela solução tampão acetato de amónio (99%) 0,05 M ajustada com ácido acético glacial para pH 6 (99%) e acetonitrila (1%). A separação cromatográfica foi obtida numa coluna C18 (5 μm, 4,6 x 150 mm) a 20 °C. Os sinais foram monitorizados pelo Diode Array Detector (DAD) no comprimento de onda (λ) de 265 nm, a um caudal de 1,2 ml/min.

Resultados: Os tempos de retenção do INH e do IS foram de 6,4 e 10,5 respetivamente. Os limites de deteção e quantificação de INH foram de 0,09 e 0,3 μg/ml, respetivamente. O presente método é específico e linear na gama de 0,5 a 8 μg/ml com um coeficiente de regressão de 0,998. Além disso, este método é exato e preciso, como demonstrado por testes estatísticos apropriados recomendados para a validação de métodos bioanalíticos.

Conclusão: Desenvolvemos e validámos um método simples, rápido e conveniente para a determinação plasmática de INH em doentes com tuberculose a receber este tratamento.