Yi Ning, Zhong Jie Li, Yin Fen Duan, Zhi Hui Peng e Le Deng
Um novo biossensor para detecção de Salmonella typhimurium portadora do gene SSeC com base no efeito de extinção secundária de nanotubos de carbono
Neste artigo, um biossensor sensível e seletivo foi construído para detecção de Salmonella typhimurium portadora do gene SSeC, com base no acoplamento covalente de molecular beacons (MBs) corados com daunorrubicinas (DNR) a nanotubos de carbono de parede simples (SWNTs) por meio da química EDC/Sulfo-NHS. Na ausência de alvo, a fluorescência da daunorrubicina foi bastante fraca como resultado da extinção de fluorescência dupla. Ao contrário, a daunorrubicina foi competida do beacon devido à formação induzida pelo alvo de estrutura rígida entre a estrutura de loop do MB e a sequência alvo, o que resultou em uma diminuição no efeito da extinção de fluorescência dupla, portanto a intensidade da fluorescência aumentou substancialmente. O quantum alvo foi alcançado pelo incremento de fluorescência. Os resultados experimentais mostraram que a recuperação da fluorescência da daunorrubicina é proporcional à concentração do DNA alvo com a faixa de 0,2-0,7 μM e o limite de detecção baixo é de 50 nM. A intensidade da fluorescência não aumentou consideravelmente quando outras espécies de Salmonella foram detectadas pelo mesmo método, o que claramente demonstrou uma alta seletividade e especificidade para o biossensor. Além disso, as amostras reais também foram detectadas e seus limites de detecção baixos foram de até 105 UFC/mL. Consequentemente, o biossensor deve ser uma alternativa potencial aos de detecção convencionais e tem grande perspectiva na detecção, diagnóstico clínico e tratamento de microrganismos patogênicos.