Jornal de Técnicas Imunológicas e Doenças Infecciosas

Imunoensaio de microesferas de fluorescência para deteção de anticorpos contra vírus da síndrome respiratória e reprodutiva suína e circovírus suíno tipo 2 utilizando proteína A, proteína G e proteína A/G

Mohammad M Hossain e Raymond RR Rowland

O objetivo deste estudo foi o desenvolvimento de imunoensaio de microesferas de fluorescência multiplex (FMIA) para a deteção de anticorpos IgG específicos do vírus da síndrome reprodutiva e respiratória suína (PRRSV) e do circovírus suíno tipo 2 (PCV2) por incorporação de conjugados não específicos da espécie. A, G e A/G no lugar do anticorpo secundário. Foram testadas um total de 205 amostras de soro obtidas de porcos infectados experimentalmente com PRRSV e/ou PCV2. Para a produção de antigénios recombinantes, a nucleoproteína (N) do PRRSV e a proteína do capsídeo (CP) do PCV2 foram expressas em Escherichia coli e purificadas numa coluna de afinidade de níquel. As proteínas purificadas foram acopladas covalentemente a esferas de microesferas carboxiladas. Quatro antigénios alvo foram reunidos num único multiplex e testados contra soros de suínos infectados ou co-infectados com PRRSV ou PCV2. As proteínas A, G e A/G foram testadas em substituição da IgG suína conjugada secundária. Todos os conjugados foram capazes de detetar anticorpos e a deteção de respostas de IgG contra alvos antigénicos de PRRSV e PCV2 foi variada com A> A/G> G. Na ausência de reagentes específicos para as espécies, a incorporação de Proteínas A, G e A/G fornece um substituto adequado.