Jornal de Biologia Molecular e Métodos

Regeneração e reutilização de inserções de cultura do tipo Transwell para modelação de barreiras hematoencefálicas

Margarita Shuvalova1,2,3,* e Georgii Nosov2,3

As inserções de cultura do tipo Transwell são amplamente utilizadas em laboratórios de todo o mundo para modelar vasos não cerebrais, a Barreira Hematoencefálica (BHE) e outras barreiras de tecidos sanguíneos, e também para o estudo de quimiotáxis e transmigração. No entanto, a utilização de insertos pode gerar resíduos plásticos que causam impacto ambiental devido ao seu design único e consumo massivo. Assim, é importante desenvolver um método que possa reduzir a utilização de insertos, mas que não afete a eficiência da pesquisa. Neste estudo, propomos a utilização de uma mistura 1:1 (v:v) de 30% de peróxido de hidrogénio e 99% de ácido sulfúrico (“solução de piranha”) para remover completamente os restos celulares e a matriz das inserções de cultura . Os modelos de modelação de barreira hematoencefálica com inserções regeneradas utilizando solução de piranha possuem propriedades de barreira comparáveis ​​às das inserções frescas. Mostramos que a solução de piranha é um reagente eficaz e permite a reutilização de insertos do tipo Transwell para a modelação da barreira hematoencefálica até 5 vezes. Por conseguinte, a utilização deste método reduz enormemente a produção de resíduos laboratoriais e beneficia numerosos laboratórios em todo o mundo.