Jornal de Ciência Veterinária e Diagnóstico Médico

Um Genosensor Amperométrico para a Detecção do Vírus Causador da Doença de Marek em Aves

Poonam Nandal, Rahul khatri, Vishakha Aggarwal, Ravina, Minakshi Prasad, Hari Mohan e Chandra S. Pundir

A sonda de ADN 5’-tiolada do gene oncogénico Meq, constituída por 24 desoxinucleótidos, foi reduzida por Ditiotreitol (DTT) e imobilizada covalentemente através de ligação tiolada num elétrodo de ouro seguida de hibridização com 1-4 ng/μl de vírus da doença de Marek (MDV) único - Sonda de ADN encalhado (ss) de amostra de tumor de frango durante 10 min à temperatura ambiente. O Meqgenosensor pode detetar 1 ngss-DNA em amostras tumorais em poucos minutos por Voltametria Cíclica (CV), Voltametria de Pulso Diferencial (DPV) e Impedância Eletroquímica (EI). O elétrodo de Au modificado com ssDNA foi caracterizado por Espectroscopia no Infravermelho com Transformada de Fourier (FTIR) e Microscopia Eletrónica de Varrimento (MEV). Foi construído um genosensor amperométrico para deteção do gene Meq ligando elétrodo de Au modificado com elétrodo de ssDNA (elétrodo de trabalho) com elétrodo Ag / AgCl (elétrodo de referência) e fio de Pt (como elétrodo auxiliar) através de potenciostato. A hibridização entre a sonda de ssDNA e o ssDNA alvo foi detectada pela redução da corrente gerada pela interacção do Azul de Metileno (MB) com o G’ livre do oligonucleótido de cadeia simples. O elétrodo de ssDNA Au apresentou uma corrente ótima em 10 min a pH 8, 250C. Este é o primeiro relatório sobre a construção de um genosensor para deteção simples, rápida e específica de MDV em galinhas.