Jornal de Ciência Veterinária e Diagnóstico Médico

Clonagem e distribuição do cDNA da Neuromedina U e do seu receptor no coelho

Ejlal Ahmed Mohammed, Zhi-yu Ma e Zhi-hai Lei

A neuromedina U (NMU) é um tipo de peptídeo que foi inicialmente purificado a partir da medula espinhal de porco. Existem dois péptidos NMU-25 e NMU-8 com funções biológicas semelhantes. A NMU encontra-se nos órgãos periféricos, como o trato gastrointestinal (GI) e o sistema nervoso central (SNC). O NMU possui dois recetores NMU-R1 e NMU-R2.
O NMU-R1 é expresso particularmente nos vários tecidos periféricos, enquanto o NMU-R2 é expresso no sistema nervoso central. No entanto, a expressão e função da NMU no coelho permaneceram obscuras. Neste estudo, uma nova clonagem parcial de cDNA e expressão dos mRNA NMU, NMU-R1 e NMU-R2 em 30 tecidos de coelho
foram investigadas através de RT-PCR semiquantitativo. Os fragmentos específicos foram amplificados e os comprimentos dos fragmentos de cDNA alvo foram de 443, 366 e 203 pb, respectivamente consistentes com o tamanho esperado do fragmento, e bandas claras. Verificou-se que o ADNc clonado das sequências de coelho NMU, NMU-R1 e NMU-R2 era 84%, 84% e 87% idêntico aos dos correspondentes homólogos humanos, respectivamente. Os cDNAs de coelho NMU, NMU-R1 e NMU-R2 foram codificados como sequências de 147.122 e 67 aminoácidos, respetivamente. Entretanto, verificou-se que a sequência de aminoácidos NMU-R1 e NMU-R2 de coelho tinha uma estrutura transmembranar típica de GPCR.
Os resultados da análise de RT-PCR mostraram que a expressão dos mRNA NMU, NMU-R1 e NMU-R2 foi encontrada no sistema nervoso central e nos tecidos periféricos, enquanto os mRNA NMU foram mais abundantes nos tecidos periféricos. Estes resultados revelaram que os ARNm de NMU, NMU-R1 e NMU-R2 foram expressos em tecidos de coelho em vários padrões de distribuição. O estudo forneceu dados experimentais para futuras pesquisas sobre a função fisiológica da NMU e os seus mecanismos de ação em coelhos.