Jornal de Ciência Veterinária e Diagnóstico Médico

Comparação de três métodos alternativos para a detecção de resistência ao benzimidazol em nemátodes gastrointestinais em caprinos

AK Dixit, G Das e Pooja Dixit

A presente investigação foi planeada com o objectivo de estudar o estado da resistência ao benzimidazol em nemátodes gastrointestinais de cabras da exploração Amanala, Jabalpur, utilizando o teste in vivo de redução da contagem de ovos fecais (FECRT), ensaio de eclosão de ovos in vitro ( EHA) e teste molecular - alelo. O FECRT e o ensaio de eclosão dos ovos foram conduzidos como descrito por Coles et al. (2006). A AS-PCR foi conduzida de acordo com Chandra et al. (2015) com pequenas modificações. No teste FECR, o fenbendazol reduziu a contagem de ovos fecais em 23% com um intervalo de confiança inferior de ¬-32%. Haemonchus contortus, Trichostrongylus spp., Oesophagostomum spp., Strongyloides spp. e Bunostomum spp. larvas foram identificadas nas culturas fecais pré-tratamento, mas a coprocultura pós-tratamento revelou H. contortus (92%) como o principal nemátode exibindo resistência, seguido de Oesophagostomum spp. (8%). O valor da dose efectiva (ED50) de 0,335 μg/ml de tiabendazol confirmou a existência de nemátodes resistentes ao benzimidazol no ensaio de eclosão dos ovos. No teste molecular, o tamanho do amplicon nested PCR foi de cerca de 820 pb e os fragmentos digeridos com RsaI RFLP apresentaram fragmentos principais de 550 pb, 170 pb e 100 pb. O tamanho do gene específico do alelo suscetível, do gene específico do alelo resistente e do gene não específico do alelo foi de 603 pb, 222 pb e 774 pb, respetivamente. Os resultados da AS-PCR mostraram que 62% das larvas de H. contortus eram homozigóticas resistentes (rr), 24% heterozigóticas (rS) e 14% homozigóticas suscetíveis (SS). A prevalência do alelo de resistência ao benzimidazol (r) foi também significativamente (p<0,01) superior (74%) em comparação com o alelo suscetível (S) (26%). Embora o resultado de todos os testes indicasse a presença de nemátodes resistentes ao benzimidazol, o FECRT revelou o género de nemátodes resistentes, enquanto o AS-PCR detetou também genótipos (rr, rS, SS) da população de H. contortus.