Jornal de Ciência Veterinária e Diagnóstico Médico

Detecção de Mycoplasma Spp. em culturas celulares por protocolo de reação em cadeia da polimerase específica do género

Claudia F. Lobos, María A. Martínez e Carlos O. Navarro

Contaminação de culturas celulares com Mycoplasma spp. complica a investigação básica e o desenvolvimento de produtos biológicos. Os efeitos destas bactérias nas células cultivadas são alterações no metabolismo, nas propriedades imunológicas e bioquímicas, no crescimento, na viabilidade, etc. a infecção em culturas celulares pode
não ser detectada por inspecção visual ou microscopia comum. Por conseguinte, é importante passar por avaliações periódicas de rotina com um método rápido, altamente sensível e altamente específico. Relativamente à afirmação anterior, este livro de memórias baseou-se no diagnóstico molecular de Mycoplasma spp., através da deteção do gene 16S rRNA através da técnica convencional de reação em cadeia da polimerase, em amostras de cultura celular de diferentes laboratórios da Universidade do Chile e do Instituto de Saúde Pública. Os resultados obtidos tanto nos controlos positivos como nos controlos negativos permitiram a validação deste método na Faculdade de Ciências Veterinárias e a aplicação em amostras suspeitas do Instituto de Ciências Biomédicas da Universidade do Chile. Esta descoberta foi verificada pelo alinhamento de sequências de nucleótidos utilizando o software Clustal Ω e BLAST, ambos freeware online, dando uma percentagem de identidade de 97% de nucleótidos em relação a Mycoplasma spp. do GeneBank®.