Jornal de Ciência Veterinária e Diagnóstico Médico

Ensaio de Polarização por Fluorescência para Diagnóstico de Anticorpos Anti-Brucella abortus em Soro de Bovino: Adaptação para Utilização em Microplacas e Comparação com Testes de Aglutinação Convencionais

Gutirrez SE, Ltzelschwab CM, Daz AG e Estein SM

Ensaio de Polarização por Fluorescência para Diagnóstico de Anticorpos Anti-Brucella abortus em Soro de Bovino: Adaptação para Utilização em Microplacas e Comparação com Testes de Aglutinação Convencionais

A brucelose bovina, endémica na Argentina, é controlada pela vacinação e abate de bovinos infectados. Os testes convencionais de aglutinação e os ensaios de ligação primária como o ELISA e o ensaio de polarização por fluorescência (FPA) são utilizados para a identificação de bovinos infetados. A FPA apresenta muitas vantagens em relação aos testes de aglutinação, no entanto a maioria dos laboratórios acreditados ainda utiliza os testes de aglutinação convencionais. O FPA foi extensivamente avaliado no seu formato original de tubos de vidro de 10 mm x 75 mm, embora existam poucos relatos sobre o seu desempenho no formato de microplacas de 96 poços. O objectivo do presente estudo foi estabelecer as condições para a utilização de um antigénio comercialmente disponível (o O-polissacárido de B. abortus 1119-3 conjugado com isotiocianato de fluoresceína) para o ensaio de FPA em formato de microplaca de 96 poços, e comparar o seu desempenho diagnóstico com os testes de aglutinação convencionais actualmente utilizados na Argentina. Foram obtidas amostras de soro de 149 vacas e 20 touros pertencentes a rebanhos livres e infectados de diferentes regiões da Argentina. Foram testadas duas diluições de soro e antigénio e a polarização de fluorescência foi detectada com um leitor multimodo Beckman DTX 880.