Jornal de Ciência Veterinária e Diagnóstico Médico

Sistema de amplificação isotérmica mediada por loop (LAMP): uma revisão abrangente com especial referência à medicina veterinária

Venkatesan G*, Kushwaha A, Kumar A, Poulinlu G, Karki M, Sasikumar P

A amplificação isotérmica mediada por loop (LAMP) é um ensaio de amplificação de ácidos nucleicos simples, rápido, barato, sensível e específico a uma temperatura constante em banho-maria/bloco de calor utilizando a DNA polimerase Bst. Há necessidade de uma técnica de diagnóstico barata e robusta como alternativa aos ensaios de PCR e qPCR. O ensaio LAMP é 10-100 vezes mais sensível que o PCR. Esta técnica utiliza quatro primers especialmente concebidos, capazes de reconhecer seis regiões diferentes no ADN alvo, pelo que a especificidade é extremamente elevada. Existem vários métodos de deteção disponíveis para reações de amplificação de tubo fechado num único recipiente para minimizar/controlar a contaminação residual durante a abertura dos tubos amplificados. A técnica LAMP é empregue no diagnóstico clínico de agentes patogénicos, incluindo vírus e outras aplicações, nomeadamente tipagem de polimorfismo de nucleótido único (SNP), inspeção de adulteração de carne e deteção de OGM, determinação do sexo, deteção de pesticidas, deteção de tumores e quantificação de ADN modelo. Como método LAMP de tubo fechado, o LAMP pode ser utilizado como ferramenta de diagnóstico de campo em ambientes com poucos recursos, onde o teste de diagnóstico pode ser impraticável. Esta revisão enfatiza o princípio do LAMP, os métodos de deteção, as modificações do LAMP, as vantagens em relação ao diagnóstico molecular de rotina e as suas aplicações na medicina veterinária.